
产品概述
product description
AsA 又称维生素C。AsA 是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体和草酸盐与酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中最重要的抗氧化剂,AsA 在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用,也是衡量农作物产品品质的重要指标之一。
贝博® BBcellProbe® 植物抗坏血酸(AsA)/维生素C检测试剂盒是利用Fe3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成Fe2+,后者再与啡罗啉显色反应,从而测定样本中维生素C的含量。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
植物
仪器准备
1. 分光光度计
2. 离心机
3. 涡旋混匀器
4. 水浴锅
5. 移液器
6. 冰箱
2. 离心机
3. 涡旋混匀器
4. 水浴锅
5. 移液器
6. 冰箱
试剂准备
1. 纯水
2. PBS
3. 冰醋酸
4. 无水乙醇
5. 蛋白定量试剂盒
2. PBS
3. 冰醋酸
4. 无水乙醇
5. 蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
2.吸头
使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落;
2. 建议正式实验前取2-3个预期差异较大的样本做下预实验。
3. 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 建议正式实验前取2-3个预期差异较大的样本做下预实验。
3. 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、试剂的配制:
1. 试剂A工作液的配制:
使用前按照试剂A储备液:纯水=1:14稀释,混匀即可。
2. 试剂B工作液的配制:
使用前,1支粉剂加0.36 mL的冰醋酸再加纯水至40mL,溶解,4℃保存。
3. 试剂C工作液的配制:
因较难溶解,使用前2~4小时加95%或无水乙醇60mL充分溶解制备,4℃保存。
4. 试剂D工作液的配制:
使用前,取0.15mL试剂D储备液加纯水至25mL配成试剂D工作液,现配现用。
5. 600 g /mL Vc标准品工作液的配制:
使用前,将1支标准品粉剂溶于10mL试剂A工作液中配成600 mg /mL Vc标准品工作液,4℃可保存1-2周;
6. 6 g /mL Vc标准品工作液的配制:
取600 mg /mL Vc标准品工作液用试剂A工作液100倍稀释成6 mg /mL Vc标准品工作液备用。
二、 样本前处理
准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.1mol/L且pH值为7.0-7.4的磷酸盐缓冲液),冰水浴条件机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液(10%匀浆上清)待测。
三、 上清液
取上述组织匀浆上清0.15mL加试剂A工作液0.45mL,旋涡混匀,室温避光静置15
分钟后,3500~4000转/分,离心10分钟,上层清亮液体为上清液。
(注:组织样本也可以直接用试剂A工作液作匀浆介质匀浆制备上清液直接使用,计
算时参考组织计算第二条公式)
五、 抗坏血酸(AsA)含量计算公式
1. 按照样本质量计算
2. 按照蛋白质含量计算
1. 试剂A工作液的配制:
使用前按照试剂A储备液:纯水=1:14稀释,混匀即可。
2. 试剂B工作液的配制:
使用前,1支粉剂加0.36 mL的冰醋酸再加纯水至40mL,溶解,4℃保存。
3. 试剂C工作液的配制:
因较难溶解,使用前2~4小时加95%或无水乙醇60mL充分溶解制备,4℃保存。
4. 试剂D工作液的配制:
使用前,取0.15mL试剂D储备液加纯水至25mL配成试剂D工作液,现配现用。
5. 600 g /mL Vc标准品工作液的配制:
使用前,将1支标准品粉剂溶于10mL试剂A工作液中配成600 mg /mL Vc标准品工作液,4℃可保存1-2周;
6. 6 g /mL Vc标准品工作液的配制:
取600 mg /mL Vc标准品工作液用试剂A工作液100倍稀释成6 mg /mL Vc标准品工作液备用。
二、 样本前处理
准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.1mol/L且pH值为7.0-7.4的磷酸盐缓冲液),冰水浴条件机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液(10%匀浆上清)待测。
三、 上清液
取上述组织匀浆上清0.15mL加试剂A工作液0.45mL,旋涡混匀,室温避光静置15
分钟后,3500~4000转/分,离心10分钟,上层清亮液体为上清液。
(注:组织样本也可以直接用试剂A工作液作匀浆介质匀浆制备上清液直接使用,计
算时参考组织计算第二条公式)
五、 抗坏血酸(AsA)含量计算公式
1. 按照样本质量计算
2. 按照蛋白质含量计算
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