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保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完！
2.拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪或荧光光度计
适用样本
1.纯化的重组酶 2.细胞裂解液 3.组织匀浆液
仪器准备
1.荧光酶标仪或荧光光度计
2.离心机
3.恒温水浴/气浴
4.移液器
5.冰箱
2.离心机
3.恒温水浴/气浴
4.移液器
5.冰箱
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板
使用注意事项
1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
使用方法
电子版说明书仅供参考，最终以试剂盒里的纸质说明书为准！
液体样本：
直接测定。
样品处理
A． 细胞样品
1. 收集5×106个以上的细胞，在4℃，500×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
4. 置冰上持续振荡20-45分钟。
5. 在4℃，12000×g条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用BCA法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测。
B． 组织样品
1. 取适量组织样本剪碎，按照每50 mg/100 μl冷的裂解缓冲液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体，冰上振荡20-45分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
2. 在4℃，12000×g条件下离心5分钟。
3. 将中层上清液吸入另一预冷的干净离心管。
4. 用BCA法测定蛋白浓度。
5. 置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
蛋白定量
对上述处理过的上清进行蛋白定量。
活性检测：
1.取50 μl裂解上清（含100-200 μg蛋白），加入50 μl检测缓冲液。
2.再加入1 μl 荧光底物，充分混匀，在37℃下避光反应30分钟-2小时。
3. 荧光酶标仪检测荧光强度。
激发波长（Ex）=400 nm，发射波长（Em）=506 nm。
4. 根据待测细胞的荧光值与对照细胞样本的荧光值的比值计算相对的 IDO1活性程度变化。
液体样本：
直接测定。
样品处理
A． 细胞样品
1. 收集5×106个以上的细胞，在4℃，500×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
4. 置冰上持续振荡20-45分钟。
5. 在4℃，12000×g条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用BCA法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测。
B． 组织样品
1. 取适量组织样本剪碎，按照每50 mg/100 μl冷的裂解缓冲液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体，冰上振荡20-45分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
2. 在4℃，12000×g条件下离心5分钟。
3. 将中层上清液吸入另一预冷的干净离心管。
4. 用BCA法测定蛋白浓度。
5. 置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
蛋白定量
对上述处理过的上清进行蛋白定量。
活性检测：
1.取50 μl裂解上清（含100-200 μg蛋白），加入50 μl检测缓冲液。
2.再加入1 μl 荧光底物，充分混匀，在37℃下避光反应30分钟-2小时。
3. 荧光酶标仪检测荧光强度。
激发波长（Ex）=400 nm，发射波长（Em）=506 nm。
4. 根据待测细胞的荧光值与对照细胞样本的荧光值的比值计算相对的 IDO1活性程度变化。
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