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保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期
一年
检测方法
激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪
适用样本
动物细胞
产品特点
1.无需转染，可在活细胞内定量检测细胞自噬情况，可在活细胞内定量检测自噬小泡和监控活细胞自噬流（自噬体的合成、自噬底物到溶酶体的运输、自噬底物在溶酶体的降解过程）；
2.适用于流式细胞检测和显微镜分析；
3.可用于高通量筛选自噬的激活剂和抑制剂；
4.可选择性地对前自噬体、自噬体和自噬性溶酶体进行染色，而对溶酶体染色较少。
2.适用于流式细胞检测和显微镜分析；
3.可用于高通量筛选自噬的激活剂和抑制剂；
4.可选择性地对前自噬体、自噬体和自噬性溶酶体进行染色，而对溶酶体染色较少。
产品应用
激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪
仪器准备
1.激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.HBSS
2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色后立即进行分析。
6.本试剂采用紫外激发，不能用蓝光激发。
2.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色后立即进行分析。
6.本试剂采用紫外激发，不能用蓝光激发。
使用方法
1. 染色工作液配制：
根据样本数量，用检测缓冲液将MDC荧光染料10倍稀释，再用相应的培养基或者HBSS缓冲液40-200倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含MDC探针工作液。于生长状态下孵育15分钟-1小时（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基或PBS替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育15分钟～1小时（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液或PBS重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察或流式检测。
3. 观察结果：
在荧光显微镜（含合适滤片）/酶标仪/流式细胞仪下观察细胞。
最大激发/发射波长为350/516 nm。
根据样本数量，用检测缓冲液将MDC荧光染料10倍稀释，再用相应的培养基或者HBSS缓冲液40-200倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含MDC探针工作液。于生长状态下孵育15分钟-1小时（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基或PBS替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育15分钟～1小时（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液或PBS重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察或流式检测。
3. 观察结果：
在荧光显微镜（含合适滤片）/酶标仪/流式细胞仪下观察细胞。
最大激发/发射波长为350/516 nm。
常见问题分析
1.为什么488nm激发没有绿色荧光？
不同于大多数常见的488nm激发的绿色荧光染料，本自噬体绿色荧光探针应采用紫外光激发。
不能采用FITC的检测条件激发本自噬荧光探针。
不同于大多数常见的488nm激发的绿色荧光染料，本自噬体绿色荧光探针应采用紫外光激发。
不能采用FITC的检测条件激发本自噬荧光探针。
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