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产品概述
product description
线粒体（mitochondria）是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。
贝博BBproExtra®血浆线粒体提取试剂盒可用于各种血浆样本的线粒体提取。本试剂盒用简便快速的方法即可在40分钟内提取得到线粒体本试剂盒提取的线粒体为结构完整保留活性的线粒体，可以用于各种线粒体功能研究、蛋白提取等下游应用。
保存温度
2-8℃
有效期
一年
适用样本
血浆
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一 样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性， 不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了 避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3.实验过程中的所有试剂须预冷：所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4.离心使用预冷转子，防止线粒体膜蛋白变性和酶活丧失。
5.避免污染：血浆采集后需在1h内处理，防止血细胞破裂释放线粒体污染样品：所有耗材需高 压灭菌或无酶处理。
2.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3.实验过程中的所有试剂须预冷：所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4.离心使用预冷转子，防止线粒体膜蛋白变性和酶活丧失。
5.避免污染：血浆采集后需在1h内处理，防止血细胞破裂释放线粒体污染样品：所有耗材需高 压灭菌或无酶处理。
使用方法
1.取新鲜血液，按比例加入抗凝剂（EDTA-K2，终浓度10mmol/L；或肝素钠，终浓
度10U/mL)，轻轻颠倒混匀，4C条件下1500×g离心15min，取上层淡黄色血浆，弃去下层红细胞和白细胞。
2.取100μl-500μl待提取血浆样本，加入500μl线粒体提取液A，充分混匀。
3.在4℃C，1000×g条件下离心5分钟，将上清吸入另一干净的离心管。
4.将上清在4°C，3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
5.将上清在4°C，12000×g力条件下离心20分钟。弃上清，收集沉淀。
6.在沉淀中加入500μ冷的试剂B，轻轻混匀。
7.在4°C，12000×g力条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
8.沉淀用线粒体保存液重悬。
9.即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
度10U/mL)，轻轻颠倒混匀，4C条件下1500×g离心15min，取上层淡黄色血浆，弃去下层红细胞和白细胞。
2.取100μl-500μl待提取血浆样本，加入500μl线粒体提取液A，充分混匀。
3.在4℃C，1000×g条件下离心5分钟，将上清吸入另一干净的离心管。
4.将上清在4°C，3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
5.将上清在4°C，12000×g力条件下离心20分钟。弃上清，收集沉淀。
6.在沉淀中加入500μ冷的试剂B，轻轻混匀。
7.在4°C，12000×g力条件下离心20分钟。弃上清，留沉淀。
8.沉淀用线粒体保存液重悬。
9.即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
1.线粒体量少？
回收得到的线粒体数量取决于样本中线粒体的含量。需要足够的样品的上样量。
2.提取的线粒体具有活性吗？
本试剂盒提取的线粒体均保持其天然结构和活性。
回收得到的线粒体数量取决于样本中线粒体的含量。需要足够的样品的上样量。
2.提取的线粒体具有活性吗？
本试剂盒提取的线粒体均保持其天然结构和活性。
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